Все анализы
Фото и иллюстрации
Посев
Источник: vet.upenn.edu
|
Культура
Источник: medipharmlab.com
|
Культура
Источник: jb.asm.org
|
Антибиотикочувствительность
Источник: textbookofbacteriology.net
|
Общее описание
Культуральный метод исследования при исследовании мокроты заключается в выполнении посева патологического материала на искусственную питательную среду с последующей инкубацией. В результате инкубации на питательной среде через некоторое время вырастают чистые культуры микроорганизмов, которые представлены одним видом возбудителя. После выделения чистой культуры становится возможным проведение подробной идентификации микроорганизма по многим параметрам: по виду колоний, характеру роста, микроскопическим признакам, биохимическим и другим свойствам.
Кроме непосредственно идентификации выделение культуры микроба позволяет определить спектр антибактериальных препаратов, способных губительно воздействовать на него. Данная особенность стала особенно актуальной в последнее время из-за широкого применения антибиотиков и выработки микроорганизмами защитных механизмов, позволяющих им выживать в условиях применения многих антибактериальных препаратов.
Питательные среды могут быть различными по составу и консистенции. Различают жидкие, твердые и полужидкие питательные среды. Для каждого конкретного микроорганизма являются оптимальными условия определенных питательных сред. В некоторые среды преднамеренно добавляются вещества, угнетающие рост нежелательной микрофлоры, способной вытеснить колонии непосредственно возбудителя, такие среды называют селективными.
Аудитория риска
Аудитория риска
Обычно посев мокроты с последующей идентификацией возбудителя и определением антибиотикочувствительности выполняется при тяжело и длительно протекающих заболеваниях бронхолегочной системы, требующих назначения антибактериальных препаратов, а также в случае неэффективности приема антибиотиков.
Подготовка и проведение исследования
Подготовка и проведение исследования
Мокрота для анализа на посев собирается утром до еды, после тщательного полоскания ротовой полости и освобождения носовых ходов и глотки от слизи. Заранее подготавливается специальная стерильная емкость с крышкой. В мокроте не должно быть примесей слизи из носоглотки и слюны. Больной выполняет глубокий вдох ртом, после чего делает продолжительное откашливание. При необходимости данные действия повторяются.
Собранная мокрота доставляется в микробиологическую лабораторию. Из мокроты приготавливается мазок, который лаборантом окрашивается одним из существующих методов. Далее проводится микроскопия, делается первичное заключение о типе возбудителя. После этого специальной петлей выполняется нанесение патологического материала на питательную среду (посев). Питательная среда и условия инкубирования (температура, продолжительность, наличие кислорода и т.д.) выбираются в каждом отдельном случае индивидуально в зависимости от предполагаемого возбудителя.
Питательная среда, на которую был посеян материал, помещается в термостат. После того, как на ней вырастают колонии микроорганизмов, производится оценка внешнего вида колоний, производится повторная микроскопия. С целью идентификации могут использоваться дополнительные методы исследования, такие как определение биохимических свойств микроорганизмов.
Для определения чувствительности к антибиотикам предложено несколько методов. Наиболее распространен дисковый метод. Для его проведения выделенный возбудитель наносится на твердую питательную среду, после чего туда же пинцетом поочередно укладываются в определенном порядке диски, содержащие различные антибиотики. Между дисками сохраняется интервал. Далее среда инкубируется в термостате в течение суток, после чего оценивается интенсивность роста. Вокруг дисков с эффективными антибиотиками формируются зоны отсутствия роста.
Вместо дисков могут использоваться тест-полоски, на которых антибиотик нанесен в виде градиента концентрации со специальной шкалой. По уровню отсутствия роста культуры можно судить о минимально эффективной дозе антибиотика. Метод разведения предполагает добавление различных концентраций антибиотика в серию пробирок с культурой микроорганизма.